Seit die schlagkräftigen Turtles Leonardo, Raphael, Michelangelo und Donatello ihren Erzfeind Shredder und seinen Foot-Clan besiegt haben, ist einige Zeit vergangen. Mit dem familiären Zusammenhalt der mutierten Schildkröten-Brüder ist es inzwischen nicht mehr weit her: Leonardo hat sich in den südamerikanischen Dschungel zurückgezogen, um über die Vervollkommnung seiner Kampfkünste zu meditieren. Superhirn Donatello betreibt im heimischen New York ein Callcenter für verzweifelte Computerfreaks, während Spaßvogel Michelangelo als Schildkröten-Clown von einem Kindergeburtstag zum nächsten rast. Einzig der draufgängerische Raphael sorgt nach alter Turtles-Tradition für Recht und Ordnung und begibt sich Nacht für Nacht auf Verbrecherjagd. Dabei braucht die Stadt die Hilfe der vier Ninja-Turtles dringender als je zuvor: Seit neuestem schleichen monströse Gestalten durch die Häuserschluchten des Big Apple, und auch der verbrecherische Foot-Clan sorgt dank seiner neuen Anführerin Karai wieder für Unruhe. Dem alten Mentor der Turtles, dem in eine Ratte verwandelten Meister Splinter, gelingt es schließlich, seine Schützlinge wieder zu vereinen. Gemeinsam mit ihren menschlichen Freunden April O?Neil und Casey Joney nehmen die kampferprobten Kröten den Kampf mit einem unbekannten Gegner auf. Doch die Turtles müssen nicht nur gegen Ninjas und uralte Ungeheuer bestehen - sie bekommen es auch mit einem unsterblichen Krieger und seinen vier steinernen Generälen zu tun, die es auf nichts Geringeres als die Weltherrschaft abgesehen haben...

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